如何解决临床检验工作中的常见问题
所有实验结果都有成功或失败，实验的失败可能是应该出结果而没有出，我们把它称作假阴性，不该出结果而出了结果我们把它称为假阳性。PCR实验中最常见的问题就是假阴性和假阳性问题。 PCR产物可通过琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，以前者最常用，通过电泳可以判断扩增产物的大小。在临床检测中，仅通过凝胶电泳判断扩增片段大小即可满足检测的需要。通常制胶方法为100mlTBE加1.5g琼脂糖在微波锅内溶解，稍冷后倒入电泳槽。电泳后，用溴化乙淀染色20min，然后用去离子水漂洗2次，每次15min，于UV灯下观察结果并拍照。凝胶电泳不仅可以鉴定产物的大小，检测扩增的情况，还可以用来纯化扩增产物。 本法避免了电泳和杂交的步骤，适于常规ELISA记数仪检测。因为5'端修饰后仍可进行常规PCR扩增特异靶序列。因此，可以通过修饰一个引物的5′端使其携带便于PCR产物固定的功能基因，而通过另一引物5′-端的修饰使产物便于检测。
你是学检验的吗？还可以在体液中检验的，比如渗出液或漏出液测定乳酸脱氢酶。同工酶（Isozyme／Isoenzyme）是指性质不同（Vmax和／或Km不同）但催化反应相同的酶，又称为同功异构酶。比如谷草转氨酶有2种同工酶，LDH有5种同工酶，胆碱酯酶没有同工酶。
.〔摘要〕 目的：探讨解决临床检验工作中的常见问题及解决方法。方法：从对于标本、设备和试剂及人为因素三方面造成的问题阐述解决方法。不合格的标本加以注明，了解被检者用药史，对标本病理部分的甄别；熟练掌握仪器设备的操作、保养和故障排除方法，加强对试剂的管理；制定严格的操作规程，发现错误及时纠正。结果：临床检验中的误差可以通过上述方法得以消除，保证临床检验的准确性。结论：提高临床检验的准确性，对疾病预防、诊断、疗效和预后的判断，对健康状况的评价等方面发挥着巨大的作用。〔关键词〕 临床检验；标本；试剂；常见问题；解决方法
进入21世纪，科学技术的日新月异，医学科学也取得了空前发展，实验室诊断已经成为现代医学极为重要的组成部分，越来越多的疾病依赖于精确的检验结果才得以做出正确诊断，使得检验医学向着机械化、自动化、简易化仪器的方向发展。为此许多医院都配备了高精度、高科技含量的仪器设备，各种实验使用试剂也向操作更加简便、快速、性能稳定的方向发展，大大提高了临床检验的效率以及检测结果的准确性和可信性。然而再先进的仪器设备也需要人去调试、操作、保养，因而不可避免地存在着一些人为因素引起的差错，如何在检验工作中把人为因素引起的差错降到最低，这就要求检验人员本着严谨、科学的态度对待整个检验过程，严格按照操作规程操作，熟练掌握检验技能，不断提高数据的科学性，杜绝人为因素造成的检验差错。关于临床检验工作中一些常见问题及解决方法分析如下。
1 标本引起的问题
1.1 标本采集不合要求是造成检验结果误差的一个重要原因
1.1.1 采集标本操作不当 如直接从输液手臂抽血，造成血标本被稀释；采完静脉血后不拔掉针头即将血液注入试管造成血标本溶血。
1.1.2 标本不合格 目前血液检验已全部采用血细胞全自动分析仪和全自动生化分析仪检测。采取5 ml血即可做肝功、肾功、蛋白、血糖等30余项的生化系列，因此标本不合格直接影响到检验结果的准确性。如血常规检验现已由血细胞全自动分析仪进行分析，要求用抗凝血，当采血时不充分混合均匀，即使出现肉眼所未见到的小凝块，也会使血细胞数、血小板数减少。
1.1.3 随意使用抗凝剂 在血液标本的送检中有的血液标本没有按实验室要求加入特定的抗凝剂，有的血液标本抗凝比例不恰当，如血沉血标本没有按照抗凝剂：血液应是1∶4的比例，或使抗凝剂量少而血液量加大，引起血液凝固或实验结果偏低，或抗凝剂量多而血液量少使血液稀释引起实验结果偏高。
1.1.4 尿液标本的送检 对一些特殊检验的尿液标本也与一般体检一样送检，使漏检率大幅升高，如对于糖尿病患者应留取餐后2 h尿更有利于糖尿病的检出。
1.2 标本采集不合要求造成检验结果误差的解决方法 对不合格标本，如有凝块的要重新取血，如果血液与抗凝剂比例不对也应重新取血，严重溶血、乳糜血则应在报告结果时加以注明。尿标本不新鲜或是加了防腐剂的标本做尿液分析导致结果不应有的异常，应向患者询问是否服用维生素C等影响检验结果的药品，因某些药品及其代谢产物可使结果出现假阳性和假阴性；碱性尿会造成蛋白试纸假阳性，进行蛋白质实验时应注意pH值；尿蛋白浓度增高可使结果出现假阴性，尿中热不稳定过氧化酶可使红细胞出现假阳性。送检的粪便标本应送检有黏液、脓液、血液的病理部分。
2 设备和试剂引起的问题
2.1 检验人员对所使用的仪器各功能不是十分了解，且在更换试剂时没有依照说明书改变不同的参数，致使实验结果出现系统性误差。
2.2 由于仪器保养不善引起实验结果差错。
2.3 所用试剂与设备的要求不符影响实验结果。
2.4 由于设备和试剂引起检验差错的解决办法。
2.4.1 加强保管排除故障 对各种仪器试剂都配有专人加以妥善维护和保管，并且操作人员应熟练掌握仪器的性能、测定方法及简单故障的排除方法。
2.4.2 只有当仪器设备处于最佳的运行状态时，才能取得准确、可靠的检测结果 因此对所使用的仪器设备进行定期或不定期的维护、校正和保养，对其所有的附件要及时检查，特别是各类管道等要进行不定期的清洗，以防止一些纤维蛋白、试剂结晶附着管壁，导致管道阻塞造成结果的准确性下降。
2.4.3 建立仪器日常记录 应建立仪器日常使用记录、质控记录、质控图、故障及排除记录和维修记录，随时掌握仪器设备的运行状况，做好对设备的保养和养护工作。
3 人为因素造成的问题
医学检验工作终究还是人的工作，即使有再先进的仪器设备也仍然掺杂着人为因素的影响，诸如检验人员将病人姓名张冠李戴，拿错病人的标本；同一病人标本重复加样；填写检验报告时将结果出错，没有仔细核对检验报告；没有将漏检或漏填写的报告查出；有时为了迎合临床某些片面的思维，抱着息事宁人的思想，不尊重事实，任意改动检验报告等不负责任的工作态度。因此，人为因素造成问题的解决方法对检验人员来说，工作中要保持足够的耐心和细心，对由于心理因素而造成差错的检验人员，应仔细分析其原因，提出合理性的建议，指出应改进及今后努力的方向。在日常工作中必须严格执行操作规程，对临床标本做到三查三对，如有可疑标本应协调临床科室以明确原因；如对标本持有异议，应及时与医护人员沟通以期及时复查以免漏掉。对日常工作中出现的问题及时进行修正，并组织所有人员对出现的问题进行分析，避免同类问题的再次发生；要求检验人员紧跟国内外现代医学检验科学的发展，定期进行相关理论知识与仪器设备的操作和维护的培训，以使检验操作人员的业务素质得到不断提高。医学检验在疾病预防、诊断、疗效和预后的判断，在健康状况的评价等方面发挥着巨大的作用，其结果的可靠与否直接关系患者的生命，也与医疗费用的投入息息相关，因此，为了提高检测结果的可信性，更好地反映被检对象的实际情况,这就要求检验者应加强自身修养，提高业务素质，培养良好的医德医风，本着严谨、科学的态度干好自己的本职工作，加强与临床的交流与合作，与临床医生一起为提高检验结果的准确性和可信性而共同努力。
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